지렁이 동결건조기

지렁이 동결건조기

지렁이, 로열젤리, 인삼, 거북, 거북 등 기타 영양 및 건강 제품을 진공 동결 건조 공정을 통해 순수하고 천연 건조했습니다.

진공동결건조기구에 의한 지렁이 동결건조분말의 제조방법은 다음과 같은 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.

1단계: 지렁이 조분말의 제조: 살아있는 지렁이를 하루 동안 굶기고 퇴적물을 자연 토해내고 세척한 후 2035도 사이의 환기 조건에서 건조, 분쇄하여 지렁이 조분말을 만든다. 100200 메쉬 체;

2 단계: 조효소 용액 제조: 지렁이 조분말을 취하여 pH 7.8의 0.1mol/l 인산염 완충 PBS의 2배 부피로 균질화하고 0.1mol/lnacl 용액을 첨가합니다. 4도 냉장고에 밤새 넣어둔 후 10000r/min, 4도에서 15분간 원심분리하고 침전물을 버리고 상청액을 취한다. 상층액을 50도 수조에서 40분 동안 보온한 후 흐르는 물에 냉각시킨 후 4도에서 10분 동안 원심분리한 후 상층액을 취하고 상등액에 황산암모늄을 첨가하여 포화도가 30%가 되도록 한 후 3시간 동안 방치하였다. 그런 다음 8000 R/분에서 10분 동안 4도에서 원심분리하고; 상등액을 수집하고 황산암모늄을 첨가하여 포화도 70%에 도달한 후 8000r/분으로 3시간 동안 방치하고 4도에서 10분간 원심분리하여 침전물을 수집한다. 침전물을 완충용액에 녹이고 완충용액을 분자량 5kd의 투석백으로 밤새 투석하여 염을 제거한 후 투석액을 8000r/min, 4도에서 10분간 원심분리하고 상층액을 취하여 지렁이 조플라스민 용액으로 한다. ;

3단계: 조효소 정제: 지렁이 섬유소분해효소 용액을 Sephadex G75 겔 크로마토그래피에 통과시키고, 0.02mol/L 및 pH를 7.8 인산염 완충액으로 사용하여 전 컬럼에 통과시켰다. 컬럼을 제거한 후 위의 완충액을 280nm 파장에서 광흡수가 없도록 용출하였고, 용출액에는 2개의 단백질 피크가 나타났는데, 효소 활성의 피크가 첫 번째 단백질 피크와 겹쳐져 겹쳐진 부분의 효소액을 채취하였다. 탈셀룰로오스 a52 이온 교환 컬럼을 통과시키고, 컬럼을 통과하기 전에 PBS 0.05mol/l 및 pH 7.8로 균형을 맞추십시오. 그런 다음 00.5mol/l NaCl을 포함하는 PBS 이온 강도 선형 구배로 용리되었습니다. 용리액에는 3개의 단백질 피크가 있었는데, 효소 활성 피크는 단백질 피크의 세 번째 피크와 중첩되었으며, 나머지 2개의 단백질 피크는 기본적으로 효소 활성이 없었습니다. 수집된 활성 부분은 지렁이 플라스민 순수 효소였습니다.

4단계: 지렁이 플라스민의 변형: 지렁이 플라스민 순수 효소와 활성화 페그를 15ml, pH 9.2, 0.1mol/l 붕산 완충액에 첨가합니다. 순수 효소 대 페그의 중량비는 1:5입니다0. 30도에서 1시간 동안 온도를 유지하고, 반응물은 0.1mol/l, pH 7.3 인산염 완충액에서 밤새 투석한다. 투석액을 10000r/분, 4도에서 10분 동안 원심분리합니다. 상등액을 취하여 Sephadex G75 컬럼을 통과시켜 활성 성분, 즉 지렁이 플라스민 변형 효소를 수집합니다.

5단계: 지렁이 섬유소분해효소 동결건조 분말 제조: 지렁이 섬유소분해효소 개질효소를 두께 8mm 이하의 시료 트레이에 넣고 진공 지렁이 동결건조기의 건조실에 넣어 동결건조한 후 100℃에서 동결시킨다. - 35도에서 12시간 동안 건조시킨 후, 5Pa의 진공 하에서 온도를 30도까지 올려 12시간 동안 건조시키는 단계; 지렁이 플라스민 변형 효소의 동결건조 분말을 40도까지 가열하고 14시간 동안 진공건조하여 얻었다. 수분함량은 7.0%, 단백질함량은 68%, 효소활성은 1700u/mg 이었다.

매개변수:

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